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SAINT-MIX SAINT-18 Transfection新利器!!
Synvolux Therapeuticus 的市場優勢:
1. Synvolux 產品可以提高細胞 轉殖 (transfection) 的成功率至 90% 細胞以上,比起傳統使用Liposomal、 電極導入、細胞膜破壞、病毒導入等等的各類轉殖技術,有極明顯的 Efficiency 差距。
對於習慣於傳統電極導入及病毒導入的使用者,可先嘗試 Synvolux,可節省大幅度購買器材或 養病毒的時間與成本,讓實驗更有效率。
2. 對於實驗室常常需要進行的 Primary cell、Suspension cell 或 Stem cell 等較難進行轉殖的細胞, SynvoLux 產品有極優異的表現。(細胞比照表)
3. SynvoLux 產品採用對細胞完全無毒性的方式進行轉殖,故可大幅提高傳統轉殖成功率。
4. StnvoLux 的 SAINT-MIX 及 SAINT-18,是目前台灣唯一可以進行高效率 in vivo 轉殖的產品。 並由於其採用無細胞毒性轉殖技術,對於 in vivo 實驗的細胞,可提供更接近生物生理的細胞表現, 是實驗室細胞轉殖極佳的利器。
5. SynvoLux 是目前市面上最便宜且最有效率的產品,相較於市面上其他廠牌,有更優秀的實驗成效與 更低的成本需求,是國內實驗室最佳的選擇。
SynvoLux Therapeuticus 產品簡介:
SynvoLux 目前由台灣禾杏生物科技獨家代理,產品目前有下列幾項:
SAINT-MIX 採用 Amphiphilic 應用系統 ( 非 liposomal 系統 ),結合到細胞DOPE (Dioleoyl-phosphatidylethanolamine), 以達到無細胞毒性進行轉殖的效果。
此外,SAINT-MIX 採用無細胞毒性的維他命B6介面活性劑 (pyridinium surfactant),使得SANT-MIX 有高度的廣泛應用在長達 111Kb 的 DNA ( linear or plasmid )、RNA、oligonucleotides 及 protein 等各種應用上。
SAINT-MIX / DNA 複合體,可以廣泛的應用在 in vivo 或 in vitro 實驗中。 <Top>
SAINT-MIX的保存方法:
建議保存在 4 - 7℃環境中,可保持極佳穩定性達一年以上。每次開瓶使用後,請旋緊瓶蓋保存, 如此,即使經過多 次使用,也不會降低試劑效果。 <Top>
SAINT-MIX 的原理:
SAINT-MIX 進行細胞轉殖的基本原理,是藉由 SAINT-18 [1-methyl-4-(cis-9-dioleyl)methyl-pyridinium-chlorid] 分子的陽離子維他命B6端,加上以 1:1 的比例結合DOPE分子 (Dioleoyl-phosphatidylethanolamine),以最自然的方式 (endocytosis) 將載體帶入細胞內。並由於其原理不破壞細胞結構,故而有比其他傳統方式有更高的 efficiency 及更優質的實驗數據。
SAINT-18 分子結構
SAINT-MIX 可於細胞漿液 H2O 中自然地進行分解,完全無細胞毒性的設計概念,有利實驗有效地進行。 由於 SAINT-MIX 優越的設計原理,因完全無細胞毒性,可以廣泛地應用於 In vivo 或 In vitro 的實驗中。
更由於SAINT應用系統的高度成效,減低了成本的支出 (養細胞、人力、時間、無效試劑等等成本),對於實驗室來說,是最佳的選擇。 <Top>
SAINT-MIX 的應用:
1. SAINT-MIX 的 DNA 應用:
SAINT-MIX 可以廣泛地應用在各類型哺乳動物細胞,而且對於一些傳統方式較難進行細胞轉殖的細胞 ( 如HUVEV, HUAEC, HV-5 等細胞 ),有極優秀的表現,甚至有些細胞,可高達 100% 的轉殖成功率。 (細胞種類及轉殖成功率請參照Synvolux細胞轉殖表) <Top>
SAINT-MIX / DNA 對於Alkaline Phosphatase表現,有極佳的表現結果。
2. SAINT-MIX 的 Oligonucleotides 應用:
SAINT-MIX 獨特的結構,能讓真核細胞轉殖,在安全無生物細胞毒性的條件下,成功高效率地 完成細胞轉殖,並與細胞漿液有極自然的相容性。
相較於其他方法的轉殖技術,SAINT-MIX 可降低 oligonucleotides 及細胞的損傷至最低程度。
3. SAINT-MIX 的 Protein 應用:
經過實際實驗,SAINT-MIX 將 Gelonin (一種蛋白質形成的抑制蛋白) 帶入細胞中,藉由測得 35S Methionin 的上升,得知 SAINT-MIX 與 Gelonin 的結合物轉殖到細胞中,對於 Gelonin 的功能性, 並不會有任何的降低。
所以,SAINT-MIX 可以完全成功地使用在蛋白轉殖細胞的應用。
Panel A PanelB
SAINT-MIX成功地應用在螢光抗體(Panel A)及b-Galactosidase(Panel B)兩種蛋白 分別使用Cos-7(Panel A)及B16f10(Panel B)兩種細胞
SAINT-MIX 包裝容量:0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml 三種套裝,濃度皆為 0.75mM。
SAINT-18 相較於 SAINT-MIX,減少了 DOPE 的部份,直接利用 SAINT-18分子 [1-methyl-4-(cis-9-dioleyl) methyl-pyridinium-chlorid] 的結構特性,直接有效地進行細胞轉殖。
SAINT-18 尤其適合針對其它方式,各種較難做的細胞種類來進行實驗,如 Primary cell、 Suspension cell 或 Stem cell 等等,有極優秀的表現。(可達大於 90% 的細胞成功地轉殖)
在標準操作情形下 ( 1mg DNA 複合物 + 15nmol SAINT-18),2ml SAINT-18 套組可進行 100mg 的DNA轉殖。
SAINT-18 的保存方法:
建議保存在 4 - 7℃環境中,可保持極佳穩定性達一年以上。每次開瓶使用後,請旋緊瓶蓋保存,如此即使多 次使用,也不會降低試劑效果。 <Top>
SAINT-18 的原理:
SAINT-18 進行細胞轉殖的原理,是相同於SAINT-MIX,藉由 SAINT-18 [1-methyl-4-(cis-9-dioleyl)methyl-pyridinium-chlorid] 分子的陽離子維他命B6端,以最自然的方式 (endocytosis) 將載體帶入細胞內。
並由於其原理不破壞細胞結構,故而有比其他傳統方式有更高的 efficiency 及更優質的實驗數據。
SAINT-18 分子結構
SAINT-18分子可以完全地分解於 H2O 之中,對於轉殖細胞,完全無生物細胞毒性。因而可大幅提升轉殖成功率,提高實驗室轉殖效率。 <Top>
SAINT-18 的應用:
SAINT-18 可以廣泛地應用在各種哺乳動物細胞轉殖上,尤其是一些其他方式難以進行轉殖的細胞, 例如 primary endothelial cells (HUVEV, HUAEC, H5V) 等細胞,其 Efficiency 可以達到 15% ~ 50%, 相較於其他方式的轉殖,SAINT-18 大幅度提高了實驗室的效率及節省了各種器材、養病毒的時間 及人力等的成本浪費。
SAINT-18 無細胞毒性的設計概念,對於此類難以進行的細胞轉殖,提供了更好的選擇。 也因 SAINT-18 無細胞毒性,可以廣泛地應用在 In vivo 的臨床前期實驗應用 (pre-clinical experiment)。
SAINT-18 也是目前台灣市面上,唯一可以進行 In vivo 及 in vitro 的專業實驗試劑。
然而,SAINT-18 已經在申請人體實驗階段當中,目前僅適合進行動物活體實驗,未來可望直接應用到人體實驗上。
經過尾部靜脈注射的老鼠,SAINT-18 應用在抗SARS的DNA Vaccine。 成功地在 1、2、3月,用ELISA方法,明顯地觀察到抗SARS病毒套模蛋白的抗體產生。
SAINT-18 包裝容量:0.5 ml 套裝,濃度為 0.75mM。
常見實驗影響因素:
SAINT 系列應用系統常見的實驗影響因素如下,提供給使用者作為參考:
1. DNA、RNA、Oligonucleotides 及 Protein 的濃度與純度因素。
2. 細胞培養 (細胞因素) --- 細胞種類、細胞循環 (cell cycle) 等因素。
3. Vector 結構因素 --- 如 promotor、Poli-A tail、codon 等。
4. 蛋白表現因素 --- 如 time-dependent expression levels、表現蛋白所造成的細胞毒性等。
5. 有效的 SAINT / DNA 結合物濃度因素 (若DNA等濃度雖夠,卻缺乏有效結合時間與環境,將造成影響)。
使用SAINT應用系統,實際進行如下實驗,發現SAINT應用系統確實完全無生物毒性。
1. 在 BALB / C 鼠群們,尾部單一靜脈,分別注射 0、1、5、15及75 nmol 的 pEGFP-N1。 2. 使用SAINT-MIX / DNA = 15 nmol / mg 的 plasmid,進行 In vivo 的細胞轉殖。 3. 在注射後 2 ~ 14 天,分別對鼠群進行評估,發現並沒有在食物、體重上有明顯變化,並且, 針對血液中的 Creatinin、SGOT、SGPT等進行分析,並沒有明顯的變化。 4. 在注射後 2 ~ 14天,分別進行器官分析,在心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腸道、卵巢及腦部 進行病理切片檢查,並沒有任何變異產生。
※此實驗最高使用DNA copy number 為 4 X 1012,相較於人類的DNA 6 X 1014,未來將有可能應用的機會。
經配合SAINT-Mix注射CMV-GFP後,14天的BALB/C 鼠尾部靜脈血管內皮細胞攝影, 發現GFP大量生成在 In Vivo 鼠體內,SAINT-Mix 完全不影響鼠體其他正常生物功能。
由此可知,SANT 應用系統的 In Vivo 活體應用,對活體本身造成的器官病理或生物化學的影響極低。
所有表格資料引用自SynvoLux原廠網站 www.synvolux.com
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